Tải bản đầy đủ

Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8475:2010 - ISO 23065:2009

TIÊU CHUẨN QUỐC GIA
TCVN 8475:2010
ISO 23065:2009
CHẤT BÉO SỮA TỪ CÁC SẢN PHẨM SỮA – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG AXIT BÉO OMEGA-3
VÀ OMEGA-6 BẰNG SẮC KÝ KHÍ-LỎNG
Milk fat from enriched dairy products - Determination of omega-3 and omega-6 fatty acid content
by gas-liquid chromatography
Lời nói đầu
TCVN 8475:2010 hoàn toàn tương đương với ISO 23065:2009/IDF 211:2009;
TCVN 8475:2010 do Cục An toàn vệ sinh thực phẩm tổ chức biên soạn, Bộ Y tế đề nghị, Tổng
cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.
CHẤT BÉO SỮA TỪ CÁC SẢN PHẨM SỮA – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG AXIT BÉO OMEGA-3
VÀ OMEGA-6 BẰNG SẮC KÝ KHÍ-LỎNG
Milk fat from enriched dairy products - Determination of omega-3 and omega-6 fatty acid
content by gas-liquid chromatography
1. Phạm vi áp dụng
Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hàm lượng axit béo omega-3 ( -3) và omega-6
( - 6) trong chất béo sữa dạng khan được tách chiết từ các sản phẩm sữa có bổ sung hoặc
được làm giàu một cách tự nhiên các thành phần này.
Quy trình quy định này cho phép đánh giá các axit béo


- 3 và

- 6 quan trọng nhất.

CHÚ THÍCH Các ký hiệu “omega-3”, “ -3 và “ 3” là không đúng, nhưng trong sử dụng thông
thường thì tương đương với “ - 3”. Điều này cũng đúng với “omega-6”, “ -6” và “ 6”, tương
đương với “ - 6”.
2. Tài liệu viện dẫn
Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện
dẫn khi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi
năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có).
TCVN 8103 (ISO 14156), Sữa và sản phẩm sữa – Phương pháp chiết lipit và các hợp chất hòa
tan trong lipit
ISO 15884/IDF 182, Milk fat – Preparation of fatty acid methyl esters (Chất béo sữa – Chuẩn bị
các metyl este của axit béo)
3. Thuật ngữ và định nghĩa
Trong tiêu chuẩn này sử dụng thuật ngữ và định nghĩa sau:
3.1.
axit béo

- 3 ( - 3 fatty acid)

axit béo omega 3 (omega-3 fatty acid)
axit béo omega-3 [(omega-3 fatty acid (deprecated)]
axit béo -3 [( -3 fatty acid (deprecated)]
axit béo 3 [( 3 fatty acid (deprecated)]


axit không béo bão hòa đa có liên kết đôi đầu tiên ở vị trí cacbon thứ ba từ nhóm metyl cuối
cùng.
3.2.
axit béo

- 6 ( - 6 fatty acid)

axit béo omega 6 (omega-6 fatty acid)
axit béo omega-6 [(omega-6 fatty acid (deprecated)]
axit béo -6 [( -6 fatty acid (deprecated)]
axit béo 6 [( 6 fatty acid (deprecated)]
axit không béo bão hòa đa có liên kết đôi đầu tiên ở vị trí cacbon thứ sáu từ nhóm metyl cuối


cùng.
3.3.
hàm lượng axit béo

- 3 và

- 6 ( - 3 and

- 6 fatty acid content)

phần khối lượng của các chất xác định được bằng quy trình quy định trong tiêu chuẩn này.
CHÚ THÍCH Hàm lượng axit báo - 3 và - 6 được biểu thị bằng phần khối lượng tính bằng
miligam trên 100 g chất béo của các axit béo được liệt kê trong Bảng 1.
Bảng 1 – Các thành phần của hàm lượng axit béo
Chiều dài mạch và tên
gọi theo liên kết đôi

- 3 và axit béo

Tên hệ thống

-6

Tên thông thường
và/hoặc chữ viết tắt

C18: 2 - 6

axit (9Z, 12Z)-octadeca-9,12-dienoic

axit linoleic, LA

C18: 3 - 3

axit (9Z, 12Z, 15Z)-octadeca-9,12,15trienoic

axit -linolenic, -LNA

C18: 4 - 3

axit (6Z, 9Z, 12Z, 15Z)-octadeca-6,9,12,15tetraenoic

C20: 5 - 3

axit (5Z, 8Z, 11Z, 14Z, 17Z)-eicosa5,8,11,14,17-pentaenoic

EPA

C22: 5 - 3

axit (7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19Z)-docosa-7, 10,
13,16,19-pentaenoic

DPA

C22: 6 - 3

axit (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosa4,7,10,13,16,19-hexaenoic

DHA

axit stearidonic

4. Nguyên tắc
Chất chuẩn nội được bổ sung vào chất béo sữa dạng khan. Các metyl este của axit béo (FAME)
được tạo thành do este hóa. Các FAME được tách ra và được xác định bằng sắc kí khí mao
quản. Các axit béo - 3 và - 6 được định lượng dựa trên chất chuẩn nội.
5. Thuốc thử
Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích và chỉ sử dụng nước cất hoặc nước đã khử
khoáng hoặc nước có độ tinh khiết tương đương.
5.1. n-hexan [CH3(CH2)4CH3].
5.2. FAME C23:0 (tricosanoic), có độ tinh khiết 99 % phần khối lượng.
5.3. Dung dịch chuẩn FAME C23:0


Cân chính xác khoảng 25 mg C23:0 (5.2) cho vào bình định mức một vạch 25 ml (6.3). Pha loãng
bằng n-hexan (5.1) đến vạch và trộn. Dung dịch chuẩn C23:0 có thể bền trong một tháng khi
được bảo quản trong tủ lạnh.
5.4. FAME EPA C20:5

- 3, có độ tinh khiết 99 % phần khối lượng.

5.5. Dung dịch chuẩn FAME C20:5

-3

Cân chính xác khoảng 10 mg C20:5 - 3 (5.4) trong bình định mức một vạch 10 ml (6.3). Pha
loãng bằng n-hexan (5.1) đến vạch và trộn.
5.6. FAME DHA C22:6

- 3, có độ tinh khiết 99 % phần khối lượng.

5.7. Dung dịch chuyển FAME C22:6

-3

Cân chính xác khoảng 10 mg C22:6 - 3 (5.6) trong bình định mức một vạch 10 ml (6.3). Pha
loãng bằng n-hexan (5.1) đến vạch và trộn.
5.8. FAME LA C18:2

- 6, có độ 99 % phần khối lượng.

5.9. Dung dịch chuẩn FAME C18:2

-6

Cân chính xác khoảng 10 mg C18:2 - 6 (5.8) trong bình định mức một vạch 10 ml (6.3). Pha
loãng bằng n-hexan (5.1) đến vạch và trộn.
5.10. Hỗn hợp đối chứng, gồm các metyl este của axit béo
thời gian lưu.

- 3 và

- 6, để định tính dựa vào

Hỗn hợp đối chứng cần chứa các FAME của các axit được liêt kê trong Bảng 1 cùng với chất
chuẩn nội C23:0 metyl este (5.2). Hỗn hợp này có thể thu được bằng cách trộn 1 ml của bốn
dung dịch chuẩn (5.3, 5.5, 5.7 và 5.9) với 1 ml của ba dung dịch khác được chuẩn bị bằng cách
cân -linolenic, stearidonic và FAM DPA (độ tinh khiết ít nhất 80 % phần khối lượng) ở nồng độ
tương tự n-hexan (1 mg/ml).
Do giá của một số các FAME - 3 cao, nên có thể dùng các hỗn hợp có bán sẵn trên thị trường
(kể cả các FAME khác) để thay thế hỗn hợp đối chứng. Nếu sử dụng hỗn hợp FAME chưa bão
hòa đa có bán sẵn, thì cần tính đến nồng độ của chúng, chỉnh bằng n-hexan, nếu cần. Nếu
không có sẵn, thì thêm một lượng thích hợp của dung dịch chuẩn FAME C23:0 (5.3).
6. Thiết bị, dụng cụ
Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm thông thường và các thiết bị, dụng cụ cụ thể
sau:
6.1. Cân phân tích, có khả năng đọc được đến 0,1 mg.
6.2. Tủ sấy, có khả năng duy trì được nhiệt độ ở 60 oC

2 oC.

6.3. Bình định mức một vạch, dung tích 10 ml, 25 ml và 50 ml, loại A được quy định trong
TCVN 7153 (ISO 1042)(4).
6.4. Pipet một vạch, dung tích 1 ml và 5 ml, loại A được quy định trong TCVN 7151 (ISO 648) [1].
6.5. Pipet chia độ, dung tích 5 ml, loại A được quy định trong TCVN 7150 (ISO 835) [3].
6.6. Ống nghiệm, dung tích 10 ml, có nắp vặn bằng polytetraflouroethylen có lớp lót.
6.7. Máy sắc kí khí-lỏng, có gắn detector ion hóa ngọn lửa và hệ thống bơm phân dòng mao
quản hoặc bơm lên cột.
6.7.1. Khí mang, hydro hoặc heli có độ tinh khiết ít nhất là 99,999 % phần khối lượng.
6.7.2. Các loại khí khác, không được có chất nhiễm bẩn hữu cơ kể cả dạng vết (hàm lượng
hydrocacbon nhỏ hơn 1 mg/kg), nitơ và hydro, độ tinh khiết ít nhất 99,995 % phần khối lượng và
không khí tổng hợp.


6.7.3. Cột mao quản, có pha tĩnh tách được tốt các FAME.
Nên sử dụng các cột mao quản pha tĩnh polyetylen glycol có chiều dài 25 m, 30 m hoặc 60 m,
đường kính trong 0,25 mm hoặc 0,32 mm và chiều dày màng phim 0,12 m hoặc 0,25 m. Các
cột này được rửa giải các FAME trước, tiếp theo chiều dài mạch cacbon và sau đó là số lượng
các liên kết đôi. Có thể sử dụng các pha phân cực lớn hơn, như pha tĩnh cyanosilicon, nhưng
trong trường hợp này, cần chú ý đặc biệt khi nhận dạng pic, ngoài ra, với tính phân cực càng
tăng thì việc tách giữa FAME 23:0 được dùng làm chất chuẩn nội và FAME C20:5 - 3 thu được
càng khó.
6.7.4. Điều kiện sắc kí khí: Nhiệt độ lò và tốc độ dòng khí mang phụ thuộc vào các cột được
chọn và khí mang được chọn. Trong mọi trường hợp, các điều kiện được chọn phải tạo ra sự
tách biệt giữa C18:4 - 3 và C18:2 liên hợp axit linoleic (CLA) và giữa DPA (xem Hình A.1 và
Hình A.2).
Xem Ví dụ 1 và Ví dụ 2 về các điều kiện.
VÍ DỤ 1: Sử dụng khí heli làm khí mang và các điều kiện lò đẳng nhiệt, các điều kiện được áp
dụng cho việc tách tốt FAME - 3 và - 6 là:
Khí mang:

Heli ở tốc độ dòng 1,8 ml/min

Áp suất đầu cột:

120 kPa
Cột mao quản silica nung chảy

Cột:

Chiều dài 30 m
Đường kính trong 0,32 mm
Chiều dày màng 0,25 m

Pha tĩnh:

Polyetylen glycol

Nhiệt độ cột:

200 oC

Nhiệt độ cột detector và bộ bơm:

260 oC

Tỷ lệ phân dòng:

100 : 1

Thể tích mẫu được bơm:

1 l.

Sắc đồ thu được trong các điều kiện sắc kí khí lỏng này được nêu trong Hình A.1.
VÍ DỤ 2: Sử dụng khí hydro làm khí mang và các điều kiện của lò được cài đặt chương trình, các
điều kiện được áp dụng cho việc tách dùng FAME - 3 và - 6 là:
Khí mang

Hydro ở tốc độ dòng không đổi 1,2 ml/min

Áp suất đầu cột:

67 kPa
Cột mao quản silica nung chảy

Cột:

Chiều dài 30 m
Đường kính trong 0,32 mm
Chiều dày màng 0,25 m

Pha tĩnh:

(50 % cyanopropyl)-metyl polysiloxan 1

Nhiệt độ cột:

Nhiệt độ ban đầu 150 oC được duy trì trong 3 min
Tăng với tốc độ 4 oC/min đến 172 oC
Duy trì ở 172 oC trong 1 min
Tăng với tốc độ 8 oC/min đến 210 oC


Nhiệt độ cột detector và bộ bơm:

240 oC

Tỷ lệ phân dòng:

100 : 1

Thể tích mẫu được bơm:

1 l.

Sắc đồ thu được trong các điều kiện sắc kí khí lỏng này được nêu trong Hình A.2.
6.7.5. Detector ion hóa ngọn lửa, có thể được làm nóng đến nhiệt độ cao hơn 30 oC so với
nhiệt độ cuối cùng của lò cột.
6.7.6. Bơm phân dòng, có thể được làm nóng đến nhiệt độ cao hơn 30 oC so với nhiệt độ cuối
cùng của lò cột.
CHÚ THÍCH Cũng có thể sử dụng tốt hệ thống bơm lên cột cho phép phân tích này. Trong
trường hợp này, tiến hành pha loãng thích hợp với n-hexan trước khi bơm (ví dụ: 1 ml dung dịch
được chuẩn bị trong 9.2 với 9 ml n-hexan).
6.7.7. Xyranh bơm, dung tích 1 l hoặc 5 l.
6.7.8. Hệ thống tích phân, tốt nhất là được vi tính hóa.
7. Lấy mẫu
Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải đúng là mẫu đại diện. Mẫu không bị hư hỏng hoặc thay đổi
trong suốt quá trình vận chuyển hoặc bảo quản.
Việc lấy mẫu không quy định trong tiêu chuẩn này, nên lấy mẫu theo TCVN 6400 (ISO 707) [2].
8. Chuẩn bị mẫu thử
Chất béo sữa dạng khan thu được theo TCVN 8103 (ISO 14156), chú ý để loại bỏ dung môi chiết
càng triệt để càng tốt bằng cách làm nóng chất béo đến nhiệt độ không quá 60 oC để tránh phân
hủy các axit béo không bão hòa đa.
9. Cách tiến hành
9.1. Dung dịch hiệu chuẩn để xác định hệ số phản ứng của LA, EPA và DHA
Dùng pipet (6.4) lấy 1 ml dung dịch chuẩn FAME EPA (5.4), 1 ml dung dịch chuẩn FAME DHA
(5.6), 1 ml dung dịch chuẩn FAME LA (5.8) và 1 ml chất chuẩn nội FAME C23:0 (5.3) cho vào
ống nghiệm (6.6.) và trộn.
9.2. Phần mẫu thử
Làm nóng chảy mẫu thử (Điều 8) ở 50 oC. Lắc mẫu nóng chảy trong 1 min để có được mẫu thử
đồng nhất. Cân 100 mg mẫu đồng nhất, chính xác đến 1 mg, cho vào ống nghiệm (6.6).
Trước khi chuẩn bị FAME theo ISO 15884, dùng pipet (6.4) lấy 1 ml dung dịch chuẩn FAME
C23:0 (5.3). Do đó, chỉ thêm 4 ml n-hexan thay vì 5 ml được quy định trong ISO 15884. Lượng
chất chuẩn nội (FAME C23:0) là khoảng 1 % phần khối lượng của chất béo. Điều này rất hữu ích
để định lượng các axit béo - 3 và - 6 trong khoảng từ 0,5 % đến 4 % phần khối lượng (ví dụ:
các sản phẩm có bổ sung dầu cá).
Nếu nồng độ của một hoặc nhiều axit béo - 3 và - 6 cao hơn 4 % phần khối lượng (nghĩa là
sản phẩm có bổ sung dầu lanh) thì nồng độ của FAME C23:0 sẽ phải tăng lên. Trong trường hợp
này, việc bổ sung 5 ml n-hexan quy định trong ISO 15884 cần được thay thế bằng 5 ml FAME
C23:0 (5.3).
Khi kết thúc quá trình metyl hóa, chuyển 2 ml phần nổi phía trên sang ống nghiệm (6.6), hoặc
trực tiếp vào các lọ lấy mẫu tự động. Dung dịch này được dùng ngay để phân tích sắc kí khí
hoặc có thể được bảo quản trong tủ lạnh đến 2 ngày.
9.3. Xác định chất lượng


Bơm 1 l của hỗn hợp đối chứng (5.10) vào máy sắc kí khí. Ghi lại thời gian lưu của các pic có
thể quy cho chất chuẩn nội C23:0, LA, -LNA, axit stearidonic, EPA, DPA và DHA.
9.4. Định lượng
9.4.1. Tính hệ số phản ứng
9.4.1.1. Bơm vào máy sắc kí khí 1 l dung dịch hiệu chuẩn (9.1). Xác định diện tích các pic được
quy cho FAME C23:0, LA, EPA và DHA.
9.4.1.2. Tính hệ số phản ứng, fr , đối với FAME của LA, EPA và DHA, tương ứng, theo công thức
(1):
fr

m w AC 23:0
mC 23:0w C 23:0 A

(1)

Trong đó:
AC23:0 là diện tích pic của FAME C23:0 (9.4.1.1);
A là diện tích pic của FAME của LA, EPA hoặc DHA (9.4.1.1);
mC23:0 là khối lượng của FAME C23:0 trong dung dịch hiệu chuẩn (9.1), tính bằng miligam (mg);
m là khối lượng của FAME của LA, EPA hoặc DHA trong dung dịch hiệu chuẩn (9.1), tính bằng
miligam (mg);
WC23:0 là độ tinh khiết của FAME C23:0 (5.2), ví dụ: wC23:0 = 0,99, tính bằng miligam trên miligam
(mg/mg);
w là độ tinh khiết của FAME chuẩn của LA, EPA hoặc DHA (5.4, 5.6 hoặc 5.8), ví dụ: w = 0,99,
tính bằng miligam trên miligam (mg/mg).
9.4.2. Xác định trên phần mẫu thử
Bơm 1 l phần mẫu thử (9.2) vào máy sắc kí khí, áp dụng các điều kiện tương tự như đã sử
dụng cho dung dịch hiệu chuẩn. Xác định diện tích pic được coi là FAME của dung dịch chuẩn
nội C23:0, LA, -LNA, axit stearidonic, EPA, DPA và DHA.
Lặp lại việc bơm các dung dịch hiệu chuẩn và tính fr (9.4.1.2).
9.5. Tính và biểu thị kết quả
9.5.1. Bằng cách sử dụng các kết quả của dung dịch chuẩn (9.1) được bơm trước và sau khi
phân tích phần mẫu thử, tính hệ số phản ứng trung bình, nghĩa là, fri , đối với các FAME của LA,
EPA và DHA, độ lệch chuẩn và hệ số biến thiên giữa các giá trị. Phép xác định thành công cho
các hệ số biến thiên nhỏ hơn 2.
CHÚ THÍCH Hệ số phản ứng tính được đối với EPA FAME cũng có thể áp dụng cho FAME của
-linolenic và axit stearidonic và hệ số phản ứng tính được đối với FAME DHA cũng áp dụng
được cho FAME DPA.
9.5.2. Tính phần khối lượng của từng axit béo - 3 và
miligam trên 100 g chất béo, theo công thức (2):
wi

mC 23:0wC 23:0 Ai fri
x 100000
AC 23:0 ms

- 6 trong phần mẫu thử, wi, bằng

(2)

Trong đó:
AC23:0 là diện tích pic của FAME C23:0 (9.4.2);
Ai là diện tích pic của từng FAME

- 3 và

- 6 trong phần mẫu thử (9.4.2);


fri là hệ số phản ứng trung bình của từng FAME

- 3 và

- 6 (9.5.1)

ms là khối lượng của phần mẫu thử (9.2), tính bằng miligam (mg);
mC23:0 là khối lượng của dung dịch chuẩn FAME C23:0 trong phần mẫu thử (9.2), tính bằng
miligam (mg);
wC23:0 là độ tinh khiết của FAME chuẩn C23:0 (5.2), ví dụ: w23:0 = 0,99, tính bằng miligam trên
miligam (mg/mg);
9.6. Biểu thị kết quả
Biểu thị kết quả chính xác đến một chữ số thập phân.
10. Độ chụm
Các chi tiết của các phép thử liên phòng thử nghiệm về độ chụm của phương pháp phù hợp với
TCVN 6910-1:2001 (ISO 5725-1:1994) và TCVN 6910-2:2001 (ISO 5725-2: 1994) được nêu
trong Phụ lục B.
Các giá trị về giới hạn lặp lại và giới hạn tái lập được biểu thị ở mức xác xuất 95 % và có thể
không áp dụng được cho các dải nồng độ và chất nền khác với dải nồng độ và chất nền đã nêu.
10.1. Độ lặp lại
Chênh lệch tuyệt đối giữa các kết quả của hai phép thử độc lập, đơn lẻ thu được khi sử dụng
cùng phương pháp, tiến hành trên vật liệu thử giống hệt nhau trong cùng một phòng thử nghiệm,
do một người thực hiện sử dụng cùng thiết bị, trong một khoảng thời gian ngắn, không quá 5 %
các trường hợp lớn hơn 4,3 % giá trị trung bình đối với các hàm lượng axit béo - 3 và - 6
trong khoảng từ 200 mg/100 g chất béo đến 9 000 mg/100 chất béo.
10.2. Độ tái lập
Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử đơn lẻ, thu được khi sử dụng cùng phương pháp, tiến
hành thử trên vật liệu giống nhau trong các phòng thử nghiệm khác nhau, do các nhà phân tích
khác nhau sử dụng các thiết bị khác nhau, không quá 5 % các trường hợp lớn hơn 25,3 % giá trị
trung bình đối với hàm lượng axit béo - 3 và - 6 trong khoảng từ 200 mg/100 mg đến 9 000
mg/100 g chất béo.
11. Báo cáo thử nghiệm
Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:
a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử;
b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;
c) phương pháp thử đã dùng, viện dẫn tiêu chuẩn này;
d) tất cả các chi tiết thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc tùy ý lựa chọn cùng với
các chi tiết bất thường nào khác có thể ảnh hưởng tới kết quả;
e) kết quả thu được hoặc nếu kiểm tra độ lặp lại, nêu kết quả cuối cùng thu được.

PHỤ LỤC A
(Tham khảo)
Các ví dụ về phép phân tích sắc kí khí lỏng


CHÚ DẪN
C18:2C

FAME của axit linoleic liên hợp

C18:2 - 6

FAME của axit linoleic

C18:3 - 3

FAME của axit -linolenic

C18:4 - 3

FAME của axit stearidonic

C20:5 - 3

FAME của axit eicosapentaenoic

C22:5 - 3

FAME của axit docosapentaenoic

C22:6 - 3

FAME của axit docosahexaenoic

C23:0

FAME của axit tricosanoic (chuẩn hiệu chuẩn)

T

nhiệt độ lò

t

thời gian

Hình A.1 – Ví dụ 1 về sắc phổ khí lỏng của các FAME, bao gồm cả tầm nhìn mở rộng của
- 3, - 6 và vùng phân giải pic của CLA thu được dưới các điều kiện trong 6.7.4


CHÚ DẪN
C18:2C

FAME của axit linoleic liên hợp

C18:2 - 6

FAME của axit linoleic

C18:3 - 3

FAME của axit -linolenic

C18:4 - 3

FAME của axit stearidonic

C20:5 - 3

FAME của axit eicosapentaenoic

C22:5 - 3

FAME của axit docosapentaenoic

C22:6 - 3

FAME của axit docosahexaenoic

C23:0

FAME của axit tricosanoic (chuẩn hiệu chuẩn)

T

nhiệt độ lò

t

thời gian

Hình A.2 – Ví dụ 2 về sắc phổ khí lỏng của các FAME, bao gồm cả tầm nhìn mở rộng của
- 3, - 6 và vùng phân giải pic của CLA thu được dưới các điều kiện trong 6.7.4


PHỤ LỤC B
(Tham khảo)
Phép thử liên phòng thử nghiệm
Sáu mẫu chất béo dạng khan (ba cặp mẫu mù) có chứa ba phần khối lượng của dầu cá là 8 %,
10 %, 12 % và sáu mẫu chất béo dạng khan (lặp lại ba cặp mẫu mù) có chứa ba phần khối lượng
của dầu lanh là 8 %, 12 % và 16 % được chuẩn bị và được phân phối cho 17 phòng thử nghiệm
tham gia. Phép thử này được CRA - FLC Istituto Sperimentale Lattiero Caseario (IT) tổ chức
thực hiện và đánh giá.
Các kết quả được đánh giá thống kê dựa trên phần khối lượng, tính bằng miligam trên 100 g
chất béo độc lập với từng loại axit, từ đó đã phát hiện được tám mức khác nhau.
Các kết quả thu được đã được phân tích thống kê theo TCVN 6910-2:2001 (ISO 5725-2:1994) [6]
cho các dữ liệu về độ chụm như trong Bảng B.1.
CHÚ THÍCH Các kết quả chi tiết của nghiên cứu thí điểm và nghiên cứu liên phòng thử nghiệm
được nêu trong [7].
Bảng B.1 – Kết quả thử nghiệm liên phòng
Mức

1

2

3

4

5

6

7

8

Giá trị trung bình, w i

233,4 513,2 1 290,4 2 039,6 3 687,3 4 385,2 6 619,8 8 749,8

Độ lệch chuẩn lặp lại, sr

7,23 10,61 23,59

43,67

58,94

53,14

130,40

113,93

Hệ số biến thiên lặp lại,
CV(r), %

3,10

2,14

1,60

1,21

1,97

1,30

625,88

786,17

9,45

8,98

2,07

1,83

Hệ số hồi quy, br = 0,015 3

sr = br w i
Giới hạn lặp lại, r (=2,8 sr) =
2,8 br w i )

0,043 w i (4,3 % giá trị trung bình)

Độ lệch chuẩn tái lập, sR

20,37 48,82 75,35

Hệ số biến thiên tái lập,
CV(R), %

8,73

sR = bR w i
Giới hạn tái lập, R (= 2,8 sR)
= 2,8 bR w i )

9,51

5,84

180,29
8,84

318,12 390,49
8,63

8,90

Hệ số hồi quy, bR = 0,090 4
0,253 w i (25,3 % giá trị trung bình)

THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO
[1] TCVN 7151 (ISO 648), Dụng cụ thí nghiệm bằng thủy tinh – Pipet một mức
[2] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa và sản phẩm sữa – Lấy mẫu
[3] TCVN 7150 (ISO 835), Dụng cụ thí nghiệm bằng thủy tinh – Pipet chia độ
[4] TCVN 7153 (ISO 1042), Dụng cụ thí nghiệm bằng thủy tinh – Bình định mức
[5] TCVN 6910-1:2001 (ISO 5725-1:1994), Độ chính xác (độ đúng và độ chụm) của phương pháp
đo và kết quả đo – Phần 1: Nguyên tắc và định nghĩa chung.
[6] TCVN 6910-2:2001 (ISO 5725-2:1994), Độ chính xác (độ đúng và độ chụm) của phương pháp
đo và kết quả đo – Phần 2: Phương pháp cơ bản xác định độ lặp lại và độ tái lập của phương
pháp đo tiêu chuẩn.


[7] CONTARINI, G. Determination of omega-3 and omega-6 fatty acid content by gas-liquid
chromatography in milk fat from enriched products – Interlaboratory collaborative studies. Bull,
Int. Dairy Fed. 2008, (428), pp. 1-17.



Tài liệu bạn tìm kiếm đã sẵn sàng tải về

Tải bản đầy đủ ngay

×